承接上一篇对胚胎评估时间基准与原核期新规则的解读新版伊斯坦布尔共识解读（一）：胚胎评估时间基准 + 原核期新规则，本文将聚焦新版伊斯坦布尔共识中胚胎发育关键的分裂期（第 1-3 天）内容。作为早期胚胎从 2 细胞向 8 细胞增殖的核心阶段，分裂期的形态与动力学特征直接反映胚胎发育潜力，新版共识围绕该阶段评估优化调整，围绕卵裂球数量、碎片化程度、多核化三大核心参数细化标准，以下将完整呈现其中分裂期评估的核心内容。
TLT技术在分裂期评估中的核心应用价值
在分裂期胚胎评估中，延时摄影技术（TLT）是新版共识重点推荐的精准评估工具，其核心优势在于通过连续动态观察，解决静态观察的主观误差与信息缺失问题，具体应用场景贯穿卵裂球数量、碎片化、多核化三大核心参数评估，统一作用如下：
- 提供精准时间基准：基于大量TLT数据，共识确定了不同受精方式下胚胎各细胞期的中位发育时间，为最佳发育速度判断提供客观依据；
- 捕捉动态变化特征：可完整记录碎片的出现、吸收或排出过程，以及多核化胚胎从 2 细胞期到 4 细胞期的多核比例变化，避免单次静态观察的误判；
- 减少评估干扰：能清晰区分大碎片与小卵裂球，精准记录细胞分裂时间、异常分裂发生率，降低培养条件、评估时间偏差带来的判断误差；
- 提升异常识别率：相较于静态观察 6%-7% 的多核化发生率记录，TLT评估可达 23%-35%，更接近真实发生情况，减少漏判。
因此，共识建议有条件的实验室优先采用TLT技术开展分裂期评估，为胚胎质量判断提供更全面的动态数据支撑。
卵裂球数量：以最佳发育速度为核心判断标准
共识明确，分裂期胚胎的 “最佳发育速度” 需结合受精方式区分具体时间节点，且静态观察时间与胚胎实际达到对应细胞期的时间存在差异，需分别明确：
- 2细胞期（t2）：ICSI来源胚胎达到2细胞期的时间为26hpi，IVF来源胚胎为27hpi，这是基于大量TLT数据得出的中位时间，可作为判断早期分裂速度的核心参考。
- 4细胞期：静态观察建议在 44±1hpi（即授精后第2天）进行，此时胚胎理想发育状态为4细胞，但实际达到 4 细胞期的时间因受精方式不同存在差异 ——ICSI胚胎为38-43hpi，IVF胚胎为39-45hpi，且此阶段约64%（ICSI）-67%（IVF）的胚胎可达到4细胞期。
- 8细胞期：静态观察建议在68±1hpi（即授精后第3天）进行，此时胚胎理想发育状态为8细胞，而实际达到8细胞期的时间为ICSI胚胎57-63hpi、IVF胚胎58-65hpi，此阶段约49%（ICSI-51%（IVF）的胚胎可达到8细胞期。
处于上述速度区间的胚胎，其活产率显著高于偏离区间的胚胎。临床评估中需重点警惕两种异常发育情况：
- 发育过快：第 3 天胚胎细胞数超过 8 个（如 9-10 细胞）时，非整倍体率显著升高，异常分裂模式（如三向分裂、直接分裂）的发生率也更高，囊胚形成率低于标准 8 细胞胚胎。不过，若这类胚胎能成功发育至囊胚期，其后续着床潜力与 8 细胞胚胎相似，因此不建议在分裂期直接排除，而是建议延长培养至囊胚期进一步评估。
- 发育过慢：第 2 天胚胎细胞数不足 4 个、第 3 天不足 8 个的胚胎，结局始终较差 —— 已有研究显示，这类胚胎的受精率、囊胚形成率及活产率均显著低于正常发育速度胚胎，仅在无更优胚胎可用时，才考虑用于移植。
碎片化：按卵裂球等效体积分级，明确临床意义
碎片是分裂期胚胎常见的形态特征，定义为有膜包裹的胞外胞质团块，通常不含染色体，但会影响胚胎活力。新版共识按卵裂球等效体积（即碎片体积与正常卵裂球体积的比例），将碎片化程度分为三级，明确各级别的临床处理建议：
- 无碎片/轻微碎片化（<10%）：优先选择级别，对着床率影响可忽略不计。例如，4 细胞胚胎中碎片体积若小于 1 个正常卵裂球体积的 10%，胚胎发育潜力基本不受影响，可作为移植或冷冻的首选。
- 轻度碎片化（10%-25%）：可用于临床，但需结合其他参数综合判断。这类胚胎虽存在一定碎片，但多数仍具备发育至囊胚期的潜力，建议继续培养观察，若碎片无进一步增加，可保留临床应用价值。
- 重度碎片化（>25%）：建议延长培养至囊胚期，进一步评估发育潜力。已有研究显示，碎片化程度每增加一个等级，活产概率显著降低46%，且碎片化与非整倍体发生率呈正相关——碎片越多，染色体异常风险越高。因此，重度碎片化胚胎不建议直接用于分裂期移植，需通过囊胚培养筛选活力更强的胚胎。
多核化：区分类型与阶段，避免一刀切判断
多核化是分裂期胚胎的常见异常，但不同类型的多核化对胚胎潜力的影响差异显著，新版共识明确要求区分双核化与真正多核化，并结合出现阶段综合判断：
- 真正多核化（1个细胞含≥3个核）：与胚胎着床率降低、非整倍体风险升高密切相关。已有研究显示，这类胚胎的囊胚形成率低于单核胚胎，即使发育至囊胚期，非整倍体率也显著升高，临床应用时需谨慎，建议优先选择单核胚胎。
- 双核化（2细胞期含2个核）：与真正多核化不同，TLT研究显示，2细胞期双核化的胚胎，其囊胚形成率和着床率均高于真正多核化胚胎，甚至优于部分非多核化胚胎。且多核化具有动态变化特征——2细胞期存在多核化的胚胎，在发育至4细胞期时，多核化比例会显著降低（从29%-43%降至15%左右），因此不应在2细胞期直接排除，需持续观察至4细胞期再判断。
需注意的非关联形态特征
现有证据不足以证实以下形态特征对分裂期胚胎质量有负面影响，临床评估时不应作为排除依据，建议结合延长培养进一步观察：
- 卵裂球胞质特征：包括胞质空泡、中央颗粒化。部分研究认为，胞质空泡（尤其是直径 > 25μm 的大空泡）可能扭曲细胞骨架，但共识指出，空泡存在仅与受精率降低相关，对后续胚胎发育的负面证据不足，且 ICSI 操作中可通过避免将精子注入空泡减少影响；胞质中央颗粒化虽有研究报道与胚胎质量降低、非整倍体率升高相关，但分析显示其可能是卵母细胞的正常形态特征，不足以作为排除依据。
- 空间排列紊乱：即卵裂球未呈预期的三维四面体排列（如平面排列、细胞间隙过大）。已有研究证实，这类胚胎的囊胚形成率、着床率与正常排列胚胎无显著差异，无确凿证据表明其为异常胚胎，因此仍可用于临床，无需因排列问题直接排除。
- 透明带异常：包括透明带增厚、表面不规则、密度增加等。部分研究指出透明带异常可能降低受精率，但更多研究显示其与胚胎质量、着床率、冷冻存活率均无关联，现有证据不足以证实其对胚胎潜力有负面预后价值，因此具有不同透明带表型的分裂期胚胎均被认为可用于临床。
下一篇解读中，我们将聚焦囊胚期评估要点，持续为大家解读新版伊斯坦布尔共识的变更，敬请关注。